小鼠谷氨酸受体1(GluA1)elisa试剂盒操作程序总结:1)准备试剂,样品和标准品。2) 加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟。3) 洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟。4) 洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色10分钟。5) 加入终止液,15分钟内读OD值6) 计算:以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。常见问题解析:
1. 标准曲线差
解决方案:检查并校正移液器避免移液不准确;按说明书要求充分洗涤和浸泡;充分混匀和吸取试剂;进行正确的标准品梯度稀释。
2. 精密度低
解决方案:重复利用吸头、容器和覆膜易造成这个问题,建议更换新的吸头、使用新的容器和覆膜。同时加样、温育也十分重要。建议校正移液器**的加入试剂,根据说明书的要求保证充足的温育时间。
3. OD值低
解决方法:正确的储存样本,使用新鲜样本进行实验,通过混合酶标记物和底物颜色应迅速显现来检查。按照说明推荐的读数时间内读数。