悬浮细胞怎么培养?看这里

   2022-08-30 3970

  小伙伴们都知道,实验室里培养的动物细胞一般可以简单地分为两大类,贴壁细胞和悬浮细胞。贴壁细胞(adherent cells)指的是这类生长必须有可以贴附的支持物表面,只有依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长,繁殖的细胞。当细胞在该表面生长后,一般会形成两种形态,即成纤维样细胞或者上皮样细胞。而另一类则是细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,这类细胞我们称之为悬浮细胞。悬浮细胞在显微镜下观察,一般是单个生长的大小均一的圆圆的,亮亮的形态规则的细胞形态,也有部分细胞聚集,成团生长。


  实际上贴壁生长的细胞跟悬浮的细胞都有很多种。活体体内的细胞当离体置于体外培养时大多数均以贴壁方式生长,主要包括一些正常细胞和肿瘤细胞,比如成纤维细胞,骨骼组织(骨及软骨),心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞,内分泌细胞,黑色素细胞以及各种肿瘤细胞等。


  而少数细胞在体外培养时则是悬浮生长,包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞,尤其是血液白细胞以及淋巴细胞等。上次已经和小伙伴们简单聊了一下贴壁细胞的传代方法,我们就来讨论讨论悬浮细胞的培养吧。


  从悬浮细胞的定义上来说,悬浮细胞是不贴壁的,悬浮生长的细胞,所以由此可知悬浮细胞不需要酶的作用就可以使其从培养容器表面脱离,故悬浮细胞传代培养的方法较为简单。一般实验室中常用直接传代法和离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)来处理悬浮细胞。当小伙伴们观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)的时候,细胞就可以进行传代操作了。


  从显微镜下观察,如果细胞状态良好(基本无细胞碎片,细胞形态规则)时,则可以选择直接传代法。将原瓶中的培养基按比例(具体比例视实验而定,但是不能太稀,太稀细胞长不起来)分装到新的培养瓶中,然后补加新鲜培养基(补加的培养基量不能太打,否则会导致细胞因为密度过低而养不起来),然后隔天观察细胞密度来考虑是否需要补液。


  但是当从显微镜下观察,细胞状态较差时(细胞碎片较多,细胞形态不规则)时,则需要使用离心传代法。首先,要将细胞悬液转移到离心管内,1000rpm离心5 min;然后弃去上层清液,轻轻地将细胞沉淀弹散(尽量不用吹打,会导致细胞状态不好甚至死亡),使用新鲜的培养基重悬细胞;后用吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。

  智立中特(武汉)生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用,围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求,探索、发现、收集国内外的微生物资源,妥善长期保存管理;在保证生物安全和保护知识产权的前提下,为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站,由智立中特(武汉)生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造!主要展示了各种基因类型下的质粒载体!


核心提示:质粒载体网拥有强大的包含质粒载体、细胞、微生物菌种、培养基等相关产品信息在线查询功能,能根据不同属性进行需求产品的筛选功能,可以在线订购已设计入库的质粒载体!“打造平台,创造质粒大数据共享”是网站的业务主旨!质粒载体网永远欢迎您的造访!
 
标签: 悬浮细胞
反对 0举报 0 收藏 0 打赏 0评论 0
 
同类新闻
  • 联系人:肖素素
  • 电话:400-009-7996
  • 地址:湖北省武汉市东湖高新开发区软件新城健康智谷D2栋5楼
  • 手机:18907133396
我们的产品